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            新聞詳情
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            當CAR-T遇到CRISPR

            日期:2022-06-10 06:49
            瀏覽次數:1989
            摘要: 近年來腫瘤****因其顯著療效和**性備受關注,是腫瘤**中*具有前景的研究方向之一。CRISPR基因編輯系統的發展以及其在多領域的延伸應用讓研究者看到了它的巨大潛力,在腫瘤****研究中也顯示出廣泛的應用前景。在過繼性細胞**中,主要通過分離患者自身的T細胞進行個體化回輸,因受到分離T細胞的數量和異體排斥的影響,不利于大規模臨床應用。利用CRISPR/Cas9基因編輯技術構建健康人來源的通用型T細胞則可避免這種限制。CRISPR/Cas9可對TCR-T和CAR-T細胞的內源性TCR以及HLA-Ⅰ分子的基因進行敲除得到通用型效應細胞。 ...

            近年來腫瘤****因其顯著療效和**性備受關注,是腫瘤**中*具有前景的研究方向之一。CRISPR基因編輯系統的發展以及其在多領域的延伸應用讓研究者看到了它的巨大潛力,在腫瘤****研究中也顯示出廣泛的應用前景。在過繼性細胞**中,主要通過分離患者自身的T細胞進行個體化回輸,因受到分離T細胞的數量和異體排斥的影響,不利于大規模臨床應用。利用CRISPR/Cas9基因編輯技術構建健康人來源的通用型T細胞則可避免這種限制。CRISPR/Cas9可對TCR-TCAR-T細胞的內源性TCR以及HLA-分子的基因進行敲除得到通用型效應細胞。


            多基因敲除的研究,基本是在T**細胞上完成的,在CAR-T上進行多基因敲除既要完成基因敲除又要實現CAR-T的表達在技術上實現較為困難。脂質體法、磷酸鈣法等常規方法難以實現針對**細胞的高效轉染。利用病毒載體多次感染帶有要敲除的目的基因的sgRNACRISPR/Cas9載體和CAR載體,并且因多次病毒感染細胞活性降低,因此只能用電轉才能實現轉染載體的目的。

            我們來看下腫瘤****先驅之一CarlJune教授是怎樣實現高效CRISPR編輯T細胞的。201611CarlJune教授在Clinical Cancer Research雜志上發表一篇論文(Multiplexgenome editing to generate universal CAR T cells resistant to PD1 inhibition),在這篇文章的PROTOCOL中詳細介紹了如何通過CRISPR/Cas9技術對T細胞進行高效編輯,細胞轉染的部分都是通過BTX電轉儀實現的。


            1. 建立CAR-T細胞


            2. TCR的α和β鏈共轉到T細胞


            3. CRISPR/Cas9敲除TCR,B2M和PD1,消除CAR-T內源性



            階段,BTX 電穿孔系統由于它的易用性、重復性、高效率和低毒性,為CAR-T和CRISPR等**科研提供有力的保障。

            高配系統:GeminiX2

            ·        可電穿孔任何種類細胞-提供方波和指數衰減波兩種波形

            ·        觸摸屏使用界面

            ·        包含“PRESET CRISPR”等預設程序,使用方便

            ·        海量數據記錄,可實現更快優化

            ·        用戶可進行程序完全自定義控制,便于優化

            ·        可與電極杯、活體鑷子電極、高通量電擊室等配合使用

            經典系統:ECM830

            ·        靈活而高效的方波電轉染系統

            ·        助力CRISPR技術,諸多文獻應用記錄

            ·        可用電壓范圍廣

            ·        可與電極杯、活體鑷子電極、高通量電擊室等配合使用


            滬公網安備 31010502003083號

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